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绿色养殖
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猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白基因工程亚单位疫苗免疫保护试验

摘自:黑龙江畜牧兽医杂志发布时间:2018-11-02作者:admin浏览次数:55

PRRSV N蛋白极度保守,免疫原性较强,抗体产生最早且持续时间最长。杨雷等利用杆状病毒双表达系统共表达PRRSV GP5和N蛋白,免疫动物后血清中检测到较高水平的N和GP5蛋白抗体。J.Plana-Duran 等报道表达N蛋白的重组杆状病毒疫苗能诱导强烈的抗体应答,认为这种抗体无保护作用。G.Rompato等研究了IL-2、IL-4作为分子佐剂对PRRSV ORF7的DNA疫苗(phCMV-ORF7)免疫效果的影响,结果表明IL-2有益于提高DNA疫苗诱导的特异性细胞免疫,而IL-4具有抑制作用,还报道ORF7可能对降低PRRSV感染量有重要作用。

本研究通过大肠杆菌表达系统表达的PRRSV N蛋白制备疫苗,试验疫苗1#采用铝胶佐剂,试验疫苗2#在试验疫苗1#基础上加入了少量油性佐剂。用制备的PRRSV N蛋白疫苗免疫仔猪,通过抗体水平检测,发现该2种疫苗和报道的杆状病毒表达系统所表达的PRRSV N蛋白制备疫苗一样,也能诱导试验猪体液免疫应答,但与减毒活疫苗组相比,PRRSV N蛋白亚单位疫苗组产生抗体相对较慢、持续时间较短。HP-PRRSV攻毒后,PRRSV N蛋白亚单位疫苗1#组存活2头,PRRSV N蛋白亚单位疫苗2#组存活1头。两种配制方法制备的疫苗免疫猪后,虽然成活率稍有差异,但是整体的临床表现差别不明显。整体PRRSV N蛋白亚单位疫苗组3/6的猪只存活,减毒活疫苗组全部存活,攻毒对照组全部死亡。PRRSV N蛋白亚单位疫苗组存活的仔猪与攻毒对照组仔猪的临床症状情况相比要轻,攻毒后21 d剖检也表明肺部、脾脏和肾脏等病变症状较少;但与减毒活疫苗组免疫猪相比,临床症状、体征及解剖病理变化都更严重。

综上所述,PRRSV N蛋白亚单位疫苗能够引起机体的体液免疫反应,具有一定的保护作用,但不能提供完全的保护。这种情况可能的解释与G. Rompato的研究结论一致,即PRRSV N蛋白能够减少HP-PRRSV感染动物的病毒量,使被攻毒的动物感染较轻,但还是会出现感染的症状,有些动物会在大剂量攻毒时成活下来,也有一些会因出现严重感染而死亡。因此,认为PRRSV N蛋白亚单位疫苗并非完全没有保护性,但是单独使用保护性达不到弱毒活疫苗的效果。如果将N蛋白与PRRSV的其他蛋白(如PRRSV GP3、GP4、GP5、M蛋白)联合使用,将是PRRSV亚单位疫苗制备的可能有效途径。 


刘  义1,杨秀芬1,冯云飞2,黄巧珍2,荣丽丽2,蓝胜芝2,荣  俊1,2*

(1. 长江大学 生命科学学院,湖北 荆州,434125;2. 浙江诗华诺倍威生物技术有限公司, 杭州, 310000




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