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绵羊肺炎支原体主要免疫原蛋白及疫苗的研究进展

摘自:黑龙江畜牧兽医杂志发布时间:2018-11-02作者:admin浏览次数:69

1 疫苗的研究进展

最早,国内外对支原体病的研究重点为丝状支原体山羊亚种(Mmc),最初用来预防羊肺炎支原体的疫苗是用该菌制备的,但免疫效果不理想。目前,已确定Mmc不是绵羊支原体肺炎的病原而是山羊传染性胸膜肺炎的病原,并且Mmc标准株PG3株与绵羊肺炎支原体标准株Y98株无共同的保护性抗原,没有交叉免疫性。


目前,预防支原体病的疫苗主要有活疫苗与灭活疫苗两种。但为了避免风险,现普遍使用的是灭活疫苗。李新萍等将支原体培养物与灭活组织液混合制成疫苗进行试验,结果表明,比单纯的组织灭活疫苗免疫效果好,并且安全、稳定。邓光明等用分离到的病原菌自制灭活疫苗进行攻毒保护试验,通过长期观察,接种疫苗后绵羊和山羊均无异常。何存利等将绵羊肺炎支原体铝胶疫苗浓缩进行试验,结果表明,在不同羊场均有很高的免疫保护效力。韩笑等对收集的绵羊肺炎支原体临床分离株SC02培养物进行灭活处理,然后制备疫苗进行免疫保护试验,结果疫苗保护率为100%。

目前经报道的、取得新兽药证书的是由中国农业科学院兰州兽医研究所研制的二联灭活疫苗,此疫苗可同时预防绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种的感染。该疫苗的免疫程序:羔羊,1~2 mL;成年羊,4 mL;免疫期为半年,一年免疫两次。

受支原体对营养需求高、培养较为困难、培养周期长、免疫原性较弱等因素的影响,使传统疫苗的发展相对滞后,但是大部分研究者已经开始着手新型疫苗的研究,主要是对绵羊肺炎支原体蛋白质抗原结构特性的研究,目的是获得支原体主要保护性抗原基因,进行分子水平上的疫苗研究。研究发现,细胞膜和荚膜是支原体主要抗原存在区域。支原体能黏附在外膜上,同时机体也能产生针对外膜的抗体,说明外膜具有毒力因子的特性。王建昌等通过研究证实,外膜蛋白为绵羊肺炎支原体的主要保护性抗原,而外膜蛋白中分子质量为67.6 ku、39.3 ku、28.8 ku 的蛋白质是其主要保护性抗原。D. Thirkell等]研究发现,分子质量为105 ku、56 ku、40 ku、26 ku的四种蛋白质是绵羊肺炎支原体的主要膜抗原蛋白。K. Parham等对22个绵羊肺炎支原体英国分离株的研究发现,分子质量在40~43 ku的膜蛋白能与免疫血清发生强烈反应。裴艳涛等确定绵羊肺炎支原体标准株Y98具有抗原性的四种蛋白的分子质量分别为74 ku、53 ku、40 ku、26 ku,是Y98株的主要抗原蛋白。付琦提取了绵羊肺炎支原体标准株Y98的分子质量约为40 ku的外膜蛋白,记为P40,然后进行动物试验,结果表明P40是一种很好的免疫原。这些分子水平上的研究都为后续的疫苗研发奠定了基础。

另外,佐剂的选择在疫苗研发过程中也是十分重要的步骤。不同佐剂对抗原的免疫增效作用不完全相同。开发研制新型的免疫佐剂来增强疫苗的免疫效力并减少疫苗的毒副作用是未来发展的趋势。佐剂是生物反应的免疫调节剂,非特异性免疫刺激是发挥其免疫佐剂性使机体产生保护性免疫应答所必须的基本条件。对支原体疫苗而言,选择合适的佐剂才能最大程度上提高疫苗的免疫效力。由于支原体本身存在免疫原性差等因素,必须依靠佐剂来增强抗原的免疫反应力。费磊等用4种佐剂制备绵羊肺炎支原体疫苗,然后进行免疫,结果显示,常规的206余白油佐剂对绵羊肺炎支原体的免疫增强作用要劣于ISA-760佐剂。这为后续制备疫苗提供了良好的参考。

2 展望

随着农业的快速发展,养羊行业也日趋成熟,规模化养殖场也逐渐增多,随之而来的羊病发病率逐年增加。绵羊肺炎支原体病在我国部分省份均有报道,这对养羊行业是个潜在的危险。防大于治,必须通过疫苗免疫途径才能达到预防效果,但国内市场相关疫苗的免疫保护效果并不是十分理想。因此,在未来的研究中,可以从以下几个方面着手:1)对绵羊肺炎支原体外膜蛋白保护性抗原基因的研究。目前,国内外对绵羊肺炎支原体外膜蛋白保护性相关的基因报道较少,但是山羊支原体山羊亚种、山羊支原体山羊肺炎亚种、丝状支原体山羊亚种和绵羊肺炎支原体等4种羊支原体通过测序技术都已完成其基因组的测序工作,这就为将来更深入地研究分子水平上的基因、序列、免疫学等方面的问题奠定了坚实的基础。2)以黏膜免疫为基础进行支原体病的预防也是未来的一个研究方向。黏膜免疫通过病原可能进入的特殊位点进行定向保护,来阻断病原的进入。3)对佐剂进行相关研究,筛选、开发适合支原体的疫苗,能产生更好免疫应答的免疫增强佐剂,起到更好的免疫保护效果。4)研究者通过基因工程技术研究新型疫苗的同时,还应该从动物防疫方面考虑。结合防疫的需要,研究多联疫苗、治疗性疫苗来减少动物因注射疫苗引起的应激反应,减少人的劳动成本。


1,赵战勤1*,薛 2,丁文文1

(1.河南科技大学 动物科技学院兽医生物制品工程实验室,河南 洛阳 471003;2. 河南科技大学 医学技术与工程学院微生物检验实验室,河南 洛阳 471003)




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