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寒地养殖
Cold farming

复合微生态制剂对仔猪生长性能、肠道微生物和免疫功能的影响

摘自:黑龙江畜牧兽医杂志社发布时间:2018-02-12作者:admin浏览次数:876

      由饲用抗生素过度滥用衍生出的药物残留和抗药性问题日益受到关注与重视,许多国家已出台相应
政策来控制抗生素的使用[1],且随着我国养殖业的规模化快速发展,饲养密度逐步加大,养殖动物发病风险日益增高,故减少甚至禁止抗生素的使用并寻找适宜的新型绿色替代物逐步成为我国畜牧业研究的重点与热点[2]。微生态制剂具有天然、安全、无残留、无毒副作用、绿色环保等优点[3],且能够调节动物肠道的微生态平衡,促进营养物质的消化吸收,提高饲料转化率,促进动物生长发育等[4-5],有望替代抗生素成为新一代新型绿色饲料添加剂。基于此,笔者通过试验研究在断奶仔猪日粮中添加不同水平的复合微生态制剂对断奶仔猪生长性能、肠道微生物菌群、免疫功能的影响,为微生态制剂在仔猪饲料中添加提供理论依据。
      1 材料与方法
      1.1 复合微生态制剂
  复合微生态制剂为自主研发产品,主要由乳酸菌、芽孢杆菌、双歧杆菌约按2∶1∶1的比例组成,活菌总数≥8×108cfu/g。
      1.2 试验动物、疫苗与试剂盒
  21日龄健康长大二元杂交断奶仔猪,大通县养猪场提供;猪瘟弱毒活疫苗(细胞源),购自广东永顺生物制药有限公司;猪瘟抗体正向间接血凝(IHA)检测试剂盒,购自中国农业科学院兰州兽医研究所;猪IgA、IgG、IgM、白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)ELISA检测试剂盒,均购自上海朗顿生物科技有限公司。
      1.3 试验设计与饲养管理
  将120头21日龄健康断奶仔猪随机分成4组,即对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组30头猪,每组3个重复,每个重复10头猪,经预试期3d后(24日龄),对照组饲喂基础日粮,低剂量组、中剂量组、高剂量组分别在基础日粮中添加0.5,1.0,2.0g/kg的复合微生态制剂,同时在24日龄时所有试验猪免疫猪瘟弱毒活疫苗1头份。试验期28d,试验期间所有猪只均自由饮水及采食,定时进行猪舍的卫生清洁与消毒,保持猪舍清洁干燥,观察并记录各组猪只的采食与腹泻等情况。基础日粮组成及营养水平。
       1.4 测定项目及方法
       1.4.1 生长性能的测定 分别在24和52日龄时对每头猪空腹称重,计算平均日增重;记录各组猪每日饲料消耗量,计算平均日采食量;根据平均日增重和平均日采食量计算料重比;观察记录各组试验猪每日的腹泻发病数量及死亡数量,计算腹泻率和死亡率。
       1.4.2 肠道微生物指标的测定 在52日龄时各个处理组每个重复中随机抽取2头猪屠宰解剖,无菌条件下采集盲肠、结肠、直肠,并在无菌操作台中截取试验猪的同一部位盲肠、结肠、直肠,分别称取1g置于试管中,加入无菌生理盐水9mL,振荡混匀,再用灭菌生理盐水依次进行1×10-2 ~1×10-10倍系列稀释,每个稀释度分别取0.1mL分别接种3种培养基,分别进行大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌的分离培养。采用平板菌落计数法统计细菌数量,并换算成每克肠内容物所含菌落数,最后用1g肠道中细菌数的对数[lg(cfu/g)]表示。培养基种类及培养方法。
      1.4.3 免疫功能指标的测定

    在52日龄时每头猪前腔静脉采血约1.0mL,37℃放置1h,4℃放置2h后,5000r/min离心10min,吸取上清液即得血清样品。分别参照检测试剂盒说明书进行血清样品中猪瘟抗体水平、免疫球蛋白含量和细胞因子含量的测定。
      1.5 数据的统计分析
  采用Excel对数据进行初步计算,采用SPSS13.0软件进行方差统计分析,结果以“平均值±标准差”表示。
      2 结果与分析
      2.1 复合微生态制剂对仔猪生长性能的影响
  各组仔猪平均日采食量差异不显著(P>0.05),低剂量组、中剂量组、高剂量组的平均日
增重显著高于对照组(P<0.05),料重比、腹泻率均显著低于对照组(P<0.05),高剂量组料重比显著低于低剂量组和中剂量组(P<0.05),腹泻率显著低于低剂量组(P<0.05),死亡率无差异,均为0。
     2.2 复合微生态制剂对仔猪肠道微生物菌群的影响
  在盲肠中,低剂量组、中剂量组、高剂量组的大肠杆菌、双歧杆菌数量与对照组之间差异显著(P<0.05),高剂量组的乳酸杆菌数量显著高于对照组(P<0.05);在结肠中,低剂量组的大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌数量与对照组之间均差异不显著(P>0.05),高剂量组的大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌数量与对照组之间均差异显著(P<0.05),中剂量组的大肠杆菌、双歧杆菌数量与对照组之间差异显著(P<0.05);在直肠中,低剂量组、中剂量组的大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌数量与对照组之间均差异不显著(P>0.05),高剂量组的大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌数量与对照组之间均差异显著(P<0.05)。
      2.3 复合微生态制剂对仔猪免疫功能的影响
  猪瘟抗体效价、IgG、IL-2、IFN-γ含量低剂量组、中剂量组、高剂量组均显著高于对照
组(P<0.05);高剂量组的IL-2含量显著高于低剂量组和中剂量组(P<0.05);IgM含量各组之间差异不显著(P>0.05)。
       3 讨论
       3.1 复合微生态制剂对仔猪生长性能的影响
  在断奶前后由于饲粮和生活环境的急剧改变,以及仔猪自身免疫系统的不完善,仔猪在断奶后易产生应激,造成腹泻和生长受阻,导致生产性能下降[6]。本试验结果表明,以乳酸菌、芽孢杆菌、双歧杆菌为主要成分的复合微生态制能够提高断奶仔猪的平均日增重,降低料重比和腹泻率。究其原因可能是复合微生态制剂能够改善断奶仔猪的肠道环境,加强仔猪对营养物质的消化吸收,缓解仔猪断奶后产生的应激,降低腹泻率,提高仔猪生长性能,进而增加养殖经济效益。在降低断奶仔猪料重比和腹泻率方面,添加复合微生态制剂2.0g/kg的作用效果明显优于0.5g/kg和1.0g/kg添加剂量的作用效果,故临床应用中建议选择2.0g/kg作为最适添加剂量。
      3.2 复合微生态制剂对仔猪肠道微生物菌群的影响
  动物肠道内的大肠杆菌、沙门氏菌、乳酸杆菌、双歧杆菌等正常菌群保持着一种微生态平衡,是重要的非特异性防御因素,是动物机体抵抗疾病的一道天然屏障[7]。当动物处于应激、病原体感染时,常常会导致肠道菌群失调,影响机体对营养物质的消化吸收,削弱肠道的屏障功能,降低机体抵抗力,进一步加重疾病。本试验结果表明,复合微生态制剂2.0g/kg的添加水平能够显著促进断奶仔猪肠道有益菌的增殖,抑制有害菌的生长,随着大肠杆菌数量的减少,乳酸杆菌和双歧杆菌数量的增加,肠道内菌群结构产生变化,有益菌群比例增加,有害菌群比例下降,提高了仔猪的消化机能,与生长性能指标检测结果体现出了一致性,共同保障仔猪健康。
        3.3 复合微生态制剂对仔猪免疫功能的影响
  免疫球蛋白是一组由浆细胞产生的具有抗体活性的蛋白质,直接参与动物机体的体液免疫反应,其
中IgG和IgA具有抑菌、抗病毒等免疫活性,IgM具有激活补体等功能[8]。细胞因子是免疫细胞产生的一类能在细胞间传递信息、具有免疫调节和效应功能的蛋白质或小分子多肽,其在体内水平直接反映机体的免疫状况[9],其中IL-2、IFN-γ主要由TH1型细胞分泌产生,可促进T、B淋巴细胞活化、增生、分化,是常用的细胞免疫检测指标[10]。故本研究分别选择IgG、IgA、IgM免疫球蛋白含量和IL-2、IFN-γ细胞因子含量作为体液免疫和细胞免疫的检测指标,分别从体液免疫和细胞免疫方面评价仔猪的免疫功能。在调节体液免疫方面,复合微生态制剂2.0g/kg的添加水平能够显著提高猪瘟抗体效价和IgG、IgA含量(P<0.05);在调节细胞免疫方面,复合微生态制剂不同添加水平均能够提高IL-2、IFN-γ细胞因子含量,且2.0g/kg添加剂量的作用效果明显优于0.5g/kg和1.0g/kg添加剂量的作用效果。
      4 结论
  在断奶仔猪基础日粮中添加2.0g/kg微生态制剂可显著提高仔猪生长性能,降低腹泻率,促进肠道有益菌增殖,减少有害菌数量,提高仔猪免疫力。

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